Se estudió la anatomía de la lámina foliar de Myrcianthes fragrans, M. prodigiosa y M. rhopaloides con el objetivo de hallar características que permitan el reconocimiento y la separación de las especies. Se prepararon láminas semipermanentes de epidermis y de secciones transversales de la hoja. Se describieron y fotografiaron empleando un microscopio óptico calibrado con cámara incorporada. Las hojas son dorsiventrales, hipoestomáticas, con tricomas simples, cavidades secretoras subepidérmicas (común en Myrtaceae) e hipodermis abaxial (común en Myrcianthes). El patrón anatómico del nervio medio separa entre especies, características como: grosor de la lámina, paredes de las células epidérmicas en vista paradérmica, células tapa, tipo de cristales y dimensiones celulares contribuyen en la identificación. Se requerirá analizar más especies para corroborar el valor diagnóstico de la anatomía foliar en Myrcianthes.
Palabras clave: Botánica venezolana; especie Myrtaceae; Plantas de Guayana; lámina foliar; identificación de plantas; Venezuela; Caracas.
The anatomy of the leaf blade of Myrcianthes fragrans, M. prodigiosa y M. rhopaloides was studied in order to search characteristics that would allow recognition and separation of the species. Semi-permanent slides of epidermis and of cross sections of the leave were prepared. It was described and photographed using a calibrated optical microscope with camera built-in. The leaves are dorsiventral, hypostomatic, with simple trichomes, subepidermal secretory cavities (common in Myrtaceae) and hypodermis abaxial (common Myrcianthes). The pattern anatomical of the midrib separates between species, features as: thickness of the blade, walls of cells epidermal in view paradermal, cells cover, type of crystals and dimensions cell contribute in the identification. The analysis of more species will be required to confirm the diagnostic value of leaf anatomy in Myrcianthes.
Key words: Venezuelan botany; myrtaceae; plants in Guiana; Venezuela; foliar foil; identification of plants; Venezuela; Caracas.
En el mundo el género Myrcianthes agrupa aproximadamente 50 especies cuya distribución geográfica se extiende desde México hasta Chile, siendo más abundante en América del sur (Rotman 1979, Landrum et al. 1997). En Venezuela Myrcianthes tiene cerca de 15 especies, son árboles o arbustos que habitan principalmente los bosques de la región Andina (Rotman 1979, Grifo 2003, Holst 2008). En la región de la Guayana venezolana está representado por 3 especies Myrcianthes fragrans, M. prodigiosa y M. rhopaloides (Grifo 2003, Holst 2008). Se ha reportado que varias especies de Myrcianthes tienen propiedades etnomedicinales, entre ellas M. fragrans y M. rhopaloides, la primera es empleada en la medicina herbal en el tratamiento de la gripe, probablemente porque el componente principal del aceite esencial de la planta es ß-cariofileno, que presenta actividad anestésica y antinflamatoria (Mora et al. 2009); y M. rhopaloides que es usada como antibacteriano, dado que el aceite esencial es rico en Linalol, Eucaliptol, D –Limoneno y Terpineol (Maldonado et al. 2007). La investigación anatómica de órganos vegetativos proporciona una herramienta valiosa para la identificación de especies y para el reconocimiento microscópico de productos vegetales como drogas crudas o elaboradas (Lindorf 2001). La identificación de las especies de Myrcianthes basada en atributos morfológicos en algunos casos es confusa, así el objetivo de este estudio es caracterizar la anatomía de la lámina foliar de las especies de Myrcianthes presentes en la Guayana Venezolana con el objetivo de hallar características que permitan distinguirlas en diagnosis microscópicas.
Se revisaron las exsicatas (Tabla 1) de Myrcianthes fragrans, M. prodigiosa y M. rhopaloide en la colección del Herbario Nacional de Venezuela (VEN), la información sobre distribución geográfica y altitudinal se registró en base de datos. Se trabajó con material herborizado que fue rehidratado con calentamiento suave en agua por 2 horas. Se realizaron secciones transversales a mano, en la zona media de la lámina foliar y preparados de epidermis por disociación del mesofilo con una solución de ácido nítrico al 30%, se elaboraron láminas semipermanentes con glicerina 40% como medio de montaje (Johansen 1940, Roth 1964). Se empleó una coloración metacromática con azul de tolouidina en solución acuoso al 1%. Se observó, describió y fotografió la anatomía de la lámina foliar empleando un microscopio óptico calibrado Nikon Eclipse E 200 con cámara Nikon Collpix 4500 incorporada. Se realizaron las mediciones en 25 campos en tres replicas por especie y se determinaron las dimensiones promedio y desviación estándar de las estructuras estudiadas.
A continuación, se presenta la descripción anatómica de la lámina foliar de las especies guayanesas estudiadas del género Myrcianthes.
Lámina foliar bifacial de 463 ± 33,2 μm de grosor. Células de la epidermis adaxial en sección transversal de forma cuadrada de 24 ± 3,12 x 22 ± 3,07 μm, con pared recta y forma poligonal en vista paradérmica (Figura 1A).
Epidermis abaxial en sección transversal con células de forma cuadrada, de 12 ± 1,37 x 14 ± 2,77 μm, de forma poligonal y pared levemente sinuosa en vista paradérmica (Figura 1B). Cutícula superior e inferior menor de 2,4 μm de grosor. Ambas capas epidérmicas son uniestratas (Figura 2A, B) y presentan tricomas simples, escasos. Estomas anomocíticos (Figura1B), en sección transversal presentan cuernos superiores e inferiores (Figura 3B). Las cavidades secretoras son subepidérmicas, delimitadas por una capa de epitelio y están en ambas caras de la lámina (Figura 2A, B), en vista paradérmica tienen 2 células tapa con paredes onduladas, de 18 ± 6,26 x 9 ± 1,28 μm en la epidermis superior y de 24 ± 3,63 x 15 ± 4,57 μm en la epidermis inferior, se distinguen de las células típicas epidérmicas por la forma y el mayor tamaño (Figura 1A, B). Hipodermis uniestrata adaxial, con células de 18 ± 4,76 x 15 ± 3,36 μm de forma rectangular y pared gruesa (Figura 3A). El mesofilo es dorsiventral constituido por una capa de empalizada de 46 ± 5,85 mμ, 16 ± 2,79 capas de parénquima esponjoso laxo, con cristales tipo drusa abundantes (Figura 4B). Haces vasculares colaterales de 54 ± 24,9 x 42 ± 22,7 μm, distribuidos uniformemente, presentan vaina vascular de parénquima (Figura 4B, 5A). El Nervio medio es levemente convexo, de 750 ± 30,3 x 808 ± 102 μm, haz vascular bicolateral, con vaina esclerenquimática (Figura 4A). Se observan cristales tipo drusa (Figura 5A) y colénquima en relación con epidermis superior (Figura 4A).
Se encuentra en los estados Bolívar, Distrito Federal, Falcón, Guárico, Lara, Mérida, Miranda, Monágas, Nueva Esparta, Sucre, Trujillo y Zulia, en un intervalo altitudinal entre 200 y 2200 m (Grifo 2003, Holst 2008).
Se encuentra en Antillas, Estados Unidos y México (Holst 2008).
La lámina foliar bifacial de 315 ± 26,5 μm de grosor. Células de la epidermis adaxial en sección transversal de forma rectangular, de 14 ± 6,45 x 21 ± 8,46 μm, pared recta y forma poligonal en vista paradérmica (Figura 1C). Epidermis abaxial en sección transversal con células de forma cuadrada, de 13 ± 1,55 x 13 ± 1,80 μm, de forma poligonal y pared recta en vista paradérmica (Figura 1D). Cutícula superior de 7 ± 1,59 μm de grosor e inferior menor de 6 ± 1,36 μm de grosor. Ambas capas epidérmicas son uniestratas (Figura 2C, D). Estomas anomocíticos (Figura 1D), en sección transversal presentan cuernos superiores e inferiores (Figura 3D). Las cavidades secretoras son subepidérmicas, delimitadas por una capa de epitelio y están en ambas caras de la lámina (Figura 2C, D), en vista paradérmica tienen 2 células tapa con paredes rectas, de 27 ± 3,39 x 16 ± 2,49 en la epidermis superior y de 38 ± 7,9 x 23 ± 5, 79 μm en la epidermis inferior μm, se distinguen de las células típicas epidérmicas por la forma y el mayor tamaño (Figura 1C, D). Hipodermis uniestrata adaxial, con células de 15 ± 8,11 x 14 ± 7,8 μm de forma cuadrada y pared gruesa (Figura 3C). El mesofilo es dorsiventral constituido por 2 capas de empalizada de 85 ± 7,94 mμ, 9 ± 0,76 capas de parénquima esponjoso compacto, con cristales abundantes drusas y rafidios (Figura 2D). Haces vasculares colaterales de 101 ± 14,2 x 79 ± 17,6 μm, con dos casquetes de fibras y vaina vascular de parénquima, distribuidos uniformemente (Figura 4D, 5C). El Nervio medio es marcadamente convexo, de 912 ± 13,2 x 868 ± 29,2 μm, haz vascular bicolateral, con vaina esclerenquimática (Figura 4C). Se observan cristales romboides (Figura 5D).
Se encuentra los estados Amazonas y Bolívar en un intervalo altitudinal entre 1000 y 2000 m (Grifo 2003, Holst 2008).
Se encuentra en Ecuador, Guyana y Surinam (Holst 2008).
Lámina foliar bifacial de 448 ± 72,7 μm de grosor. Células de la epidermis adaxial en sección transversal de forma cuadrada, de 17 ± 7,5 x 16 ± 4,5 μm, pared recta y forma poligonal en vista paradérmica (Figura 1E). Epidermis abaxial en sección transversal de forma cuadrada, con células de 17 ± 2,08 x 15 ± 4,0 μm, pared recta y forma poligonal en vista paradérmica (Figura 1F). Cutícula superior de 9 ± 1,4 μm de grosor e inferior de 5 ± 0,48 μm de grosor. Ambas capas epidérmicas son uniestratas (Figura 2E, F). Estomas anomocíticos (Figura 1F), en sección transversal presentan cuernos superiores e inferiores (Figura 3F). Las cavidades secretoras son subepidérmicas, delimitadas por una capa de epitelio (Figura 2E, F) y más frecuentes en la epidermis adaxial, en vista superficial tienen 2 células tapa con paredes rectas, de 27 ± 3,10 x 11 ± 2,82 μm en la epidermis superior y 26 ± 3,50 x 14 ± 5,20 μm en la inferior, se distinguen de las células típicas epidérmicas por la forma, y no por el tamaño. Hipodermis uniestrata adaxial, con células de 12 ± 1,70 x 24 ± 4,77 μm de forma rectangular y pared gruesa (Figura 3E). El mesofilo es dorsiventral constituido por una capa de empalizada de 60 ± 9,47 mμ, 11 ± 1,91 capas de parénquima esponjoso laxo, sin cristales (Figura 4F). Haces vasculares colaterales, de 104 ± 36,69 x 94 ± 26,09 μm, con vaina vascular de esclerénquima, distribuidos uniformemente (Figura 4F, 5E). El Nervio medio es convexo de 910 ± 88,54 x 1192 ± 106,80 μm, constituido por 4 haces vasculares bicolaterales, con vaina esclerenquimática (Figura 4E). Se observan cristales romboides (Figura 5F).
Se encuentra en los estados Bolívar y Mérida, en un intervalo altitudinal entre 1800 y 2600 m (Grifo 2003, Holst 2008).
Se encuentra en Bolivia, Colombia, Costa Rica, Ecuador, Panamá y Perú (Holst 2008).
Las especies estudiadas presentan características en la anatomía foliar comunes para el orden Myrtales como son hojas dorsiventrales (Keating 1984) y comunes para la familia Myrtaceae tales como: presencia de cavidades secretoras, epidermis de una capa, células epidérmicas tapa de las cavidades secretoras diferentes en forma y tamaño de las células epidérmicas típicas (Metcalfe & Chalk 1979). En las Myrtaceae el número de células tapa en vista paradérmica varía de 1-4 (Callado 1997), las especies estudiadas en este trabajo tienen 2 células tapa con paredes que pueden ser curvas (M. fragrans) o rectas (M prodigiosa y M. rhopaloides). Además de los atributos antes mencionados las especies estudiadas de Myrcianthes tienen estomas levemente proyectados sobre la epidermis, hipodermis adaxial uniestrata y el patrón anatómico del nervio medio es diferente en cada una. La presencia de una capa de hipodermis uniestrata adaxial con células de pared periclinal gruesa ha sido reportada como característica distintiva del género Myrcianthes dentro de la subtribu Eugeniinae (Cardoso & Sajo 2004). Entre las especies descritas en la presente investigación la hipodermis abaxial varia en cuanto a las dimensiones celulares.
En la literatura solo se encontró la descripción de la anatomía foliar para Myrcianthes pungens (Berg.) Legr. y M. pseudomato (D. Legrand) (Romeo et al. 2014, Cardoso et al. 2009, Cortadi et al. 1996), éstas muestran las características comunes para familia Myrtaceae y para el género Myrcianthes; con las especies estudiadas en el presente trabajo comparten las siguientes características: células epidérmicas adaxiales y abaxiales de contorno sinuoso, estomas anomociticos y pelos simples unicelulares. En la literatura consultada no se encontraron referencias de medidas de células de la lámina foliar para especies del género Myrcianthes.
En la familia Myrtaceae las características de la anatomía foliar más usadas para la distinción de especies son: presencia y tipo de tricomas en hojas adultas, forma y disposición de las células epidérmicas sobre cavidades secretoras, forma de las paredes anticlinales de las células epidérmicas y estrías epicuticulares (Fontenelle et al. 1994). Las paredes anticlinales de las células epidérmicas en M. prodigiosa (rectas), M. rhopaloides (rectas) y en M. fragrans (levemente sinuosas) contribuyen en la separación de especies.
Se ha señalado que la densidad de estomas, células epidérmicas típicas y células epidérmicas sobre cavidades secretoras podrían ser de utilidad taxonómica en algunos géneros de Myrtaceae (Gomes et al. 2009).
En la presente investigación el nervio medio contribuye ampliamente en la identificación de las especies, porque varia en cuanto forma, cantidad de haces vasculares y patrón anatómico. Según Gomes et al. (2005) la organización del tejido vascular es el más evidente entre los caracteres anatómicos con valor taxonómico en especies de la familia Celestraceae. En la familia Myrtaceae generalmente el nervio medio es biconvexo, planoconvexo o cóncavoconvexo y presenta un haz vascular único (Gomes et al. 2009), en las especies de la Guayana venezolana varía desde levemente convexo (M. fragrans), marcadamente convexo (M. prodigiosa) hasta convexo (M. rhopaloides), y presentan un sólo haz vascular excepto en M. rhopaloides que tiene 4 haces.
Para Myrcianthes fragrans, M. prodigiosa y M. rhopaloides las características anatómicas del nervio medio tienen valor para análisis taxonómicos.
La presencia de cristales tipo drusa sólo se encontró en Myrcianthes fragrans permite diferenciar esta del resto de las especies estudiadas.
La anatomía foliar permite la identificación de las especies del género Myrcianthes presentes en la Guayana Venezolana no obstante, para corroborar el valor diagnóstico dentro del género es necesario incorporar más especies al análisis. En las especies estudiadas la anatomía del nervio medio, las características de las paredes anticlinales de las células epidérmicas y el tipo de cristal son las características de mayor interés taxonómico.